Extracción de ADN en células vegetelas de plátano

En esta práctica realizaremos la extracción del ADN de las células de pulpa de plátano poniendo de manifiesto su estructura fibrilar y el extraordinario grado de arrollamiento, que permite el empaquetamiento en el núcleo celular de larguísimas cadenas de esta molécula.

Fundamento.

El ADN se encuentra en el interior del núcleo de todas las células, disperso y muy replegado, unido a proteínas para formar la cromatina. Por lo tanto, podremos extraerlo a partir de prácticamente cualquier material de origen biológico. Para ello es necesario homogeneizar el tejido disgregándolo y separando sus células y demás componentes, luego romper las células para separar el núcleo y romper éste para liberar el ADN, separarlo de las proteínas y precipitarlo para separarlo de la solución acuosa.

El ADN (y también algo de ARN) aparecerá entonces como un agregado de fibras blanquecinas de aspecto mucoso que se adhieren a una varilla de vidrio o a la pipeta. Podemos añadir unas gotas de azul de metileno o verde de metilo al tubo para teñirlo. Por último, se puede situar sobre un porta, teñirlo de la misma manera y observarlo al microscopio. También se puede conservar dejándolo secar sobre papel de filtro o suspendido en alcohol al 50% o 70%.


Material necesario.

- Un plátano
- Detergente tipo lavavajillas
- Un poco de sal común
- Vasos de precipitado
- Tubo de ensayo
- Alcohol 96º
- Cristalizador
- Tenedor
- Cucharilla de plástico
- Papel de filtro
- Embudo
- Agua destilada


Procedimiento.

1º Partir medio plátano y aplastarlo en el cristalizador con el tenedor hasta que quede una especie de "papilla", es mejor si no quedan grumos. También se puede echar un poco de agua destilada para facilitar el proceso.

2º En un vaso de precipitado, echar dos cucharadas de detergente tipo lavavajillas y una pizca de sal.

3º Mezclar el lavavajillas con la sal, teniendo cuidado de que no salga espuma.

4º Añadir una cucharada de la "papilla" de plátano en en el vaso de precipitado y mezclar, volviendo a tener cuidado de que no salga espuma.

5º Filtramos la mezcla, si hace falta se le puede echar un poco más de agua destilada.

6º La solución que obtenemos se echa en el tubo de ensayo y ademas le echamos 3/4 partes de alcohol.

7º Lo dejamos reposar y al cabo de unos minutos observaremos unos filamentos blancos, estos son el ADN.


Fotografías.

"Papilla" de platano

Vaso de precipitado con lavavajillas, sal y "pure" de platano

Mezcla de  lavavajillas, sal y "pure" de platano

Tubo de ensayo; en la zona central se encuentran los filamentos blanquecinos (ADN)